ISOLASI, PURIFIKASI PARSIAL DAN KARAKTERISASI ENZIM  L-ASPARAGINASE DARI BAWANG PUTIH (Allium sativum)

Martina Widhi  Hapsari; Windy Rizkiprilisa; Nindi Kusumaningtyas; Novia Anggraeni

doi:10.53416/stmj.v1i2.37

Authors

Martina Widhi Hapsari Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Nasional Karangturi
Windy Rizkiprilisa Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Nasional Karangturi
Nindi Kusumaningtyas Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro
Novia Anggraeni Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Nasional Karangturi

DOI:

https://doi.org/10.53416/stmj.v1i2.37

Keywords:

L-asparaginase, Aktivitas spesifik, Antikanker

Abstract

Proses pemanasan yang berlebih pada pengolahan makanan dapat memicu pembentukan akrilamida. Akrilamida merupakan zat beracun yang bersifat karsinogenik pada manusia. Salah satu pencegahan untuk mereduksi akrilamida yaitu dengan penambahan enzim L-asparaginase. Enzim L-Asparaginase dapat mencegah pembentukan akrilamida dengan mengkonversi asam amino L-Asparagin sebagai prekusornya menjadi bentuk asam amino lain yaitu asam L-Aspartat. L-Asparaginase dapat ditemukan pada berbagai organisme salah satunya adalah bawang putih. Tujuan dari penelitian ini adalah mampu mengisolasi dan mengetahui karakter optimum L-Asparaginase dari bawang putih (Allium sativum). Enzim L-Asparaginase dari bawang putih diperoleh melalui beberapa tahap. Tahap pertama yaitu isolasi L-Asparaginase dari bawang putih dan pemurnian melalui pengendapan dengan amonium sulfat dan dialisis. Tahap kedua yaitu uji aktivitas spesifik dan karakterisasi L-Asparaginase dengan cara menghitung jumlah amonia yang terbentuk menggunakan pereaksi Nessler dan memperoleh kadar protein total dengan metode Lowry. Hasil penelitian ini menunjukkan aktivitas spesifik tertinggi LAsparaginase dari bawang putih pada fraksi 5 (80-100%) yaitu 1054,444 U/mg protein. Kondisi optimum L-Asparaginase bebas yaitu pada suhu 37°C, pH 8,6 dan waktu inkubasi selama 30 menit.

References

Anese, M., Quarta, B., & Frias, J. (2011). Modelling the effect of asparaginase in reducing acrylamide formation in biscuits. Food Chemistry, 126(2), 435–440.

Anese, M., Quarta, B., Peloux, L., & Calligaris, S. (2011). Effect of formulation on the capacity of lasparaginase to minimize acrylamide formation in short dough biscuits. Food Research International, 44(9), 2837–2842.

Arpintasari, A., Wuryanti, W., & Rahmanto, W. H. (2008). Isolasi dan Uji Potensi L-Asparaginase dari Rimpang Kunyit Putih (Curcuma mangga Vall) terhadap Leukimia Tipe K562. Jurnal Kimia Sains Dan Aplikasi, 11(3), 57–62.

Capuano, E., Ferrigno, A., Acampa, I., Serpen, A., Açar, Ö. Ç., Gökmen, V., & Fogliano, V. (2009). Effect of flour type on Maillard reaction and acrylamide formation during toasting of bread crisp model systems and mitigation strategies. Food Research International, 42(9), 1295–1302.

Ciesarová, Z. (2016). Impact of lasparaginase on acrylamide content in fried potato and bakery products. Acrylamide in Food [Internet]. Elsevier;[Cited 2020 Mar 28], 405–421.

Crespo, J. G., & Böddeker, K. W. (2013). Membrane processes in separation and purification (Vol. 272). Springer Science & Business Media.

Harini, K., Babu, S., Ajila, V., & Hegde, S. (2013). Garlic: It’s role in oral and systemic health. Journal of Health and Allied Sciences NU, 3(04), 17–22.

Huang, L., Liu, Y., Sun, Y., Yan, Q., & Jiang, Z. (2014). Biochemical characterization of a novel LAsparaginase with low glutaminase activity from Rhizomucor miehei and its application in food safety and leukemia treatment. Applied and Environmental Microbiology, 80(5), 1561–1569.

Kukurová, K., Ciesarová, Z., Mogol, B. A., Açar, Ö. Ç., & Gökmen, V. (2013). Raising agents strongly influence acrylamide and HMF formation in cookies and conditions for asparaginase activity in dough. European Food Research and Technology, 237(1), 1–8.

Kusumaningtias, N., Nies, S. M., & Purbowatiningrum, R. S. (2016).

Kalsium Alginat Sebagai Pendukung Amobilisasi L-Asparaginase Dari Bawang Putih (Allium Sativum). Jurnal Kimia Dan Pendidikan Kimia, 1(2), 7–15.

Mahajan, R. V, Kumar, V., Rajendran, V., Saran, S., Ghosh, P. C., & Saxena, R. K. (2014). Purification and characterization of a novel and robust L-asparaginase

having low-glutaminase activity from Bacillus licheniformis: in vitro evaluation of anti-cancerous properties. PLoS One, 9(6), e99037.

Muneer, F., Siddique, M. H., Azeem, F., Rasul, I., Muzammil, S., Zubair, M., … Nadeem, H. (2020). Microbial Lasparaginase: purification, characterization and applications. Archives of Microbiology, 1–15.

Pedreschi, F., Mariotti, M. S., & Granby, K. (2014). Current issues in dietary acrylamide: formation, mitigation and risk assessment. Journal of the Science of Food and Agriculture, 94(1), 9–20.

Pedreschi, F., Mariotti, S., Granby, K., & Risum, J. (2011). Acrylamide reduction in potato chips by using commercial asparaginase in combination with conventional blanching. LWT-Food Science and Technology, 44(6), 1473–1476.

Purwanto, M. G. M. (2016). The role and efficiency of ammonium sulphate precipitation in purification process of papain crude extract. Procedia Chemistry, 18, 127–131.

Qeshmi, F. I., Homaei, A., Fernandes, P., & Javadpour, S. (2018). Marine microbial L-asparaginase: biochemistry, molecular approaches and applications in tumor therapy and in food industry. Microbiological Research, 208, 99–112.

Sharma, A., & Mishra, S. (2017). Asparaginase: A promising aspirant for mitigation of acrylamide in foods. Int. J. Food Sci. Nutr, 2, 208–214.